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轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)

簡要描述:轉(zhuǎn)基因水稻試劑盒(熒光產(chǎn)品特點:1、靈敏度高,抗污染能力強,定量準確,重復(fù)性好;2、樣本處理與PCR擴增在同一個PCR反應(yīng)管中即可完成;3、無需加熱
產(chǎn)品說明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強。 4.精密性好。 5.結(jié)果準確可靠。 6.嚴格的質(zhì)量標準。
結(jié)構(gòu)及組成:聚合酶鏈式反應(yīng)液(PCR反應(yīng)液)、RNA
本試劑盒適用于動物組織以及食品、飼料等樣本中綿羊CYTB基因的檢測

  • 產(chǎn)  地:上海
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-08-26
  • 訪  問  量:4323

詳細介紹

品牌其他品牌貨號HXG744
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研使用應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

         轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)

通用名稱:轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)

Name   LLRICE62 derived ingredients Detection Kit(Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

【檢驗原理】本試劑盒采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術(shù),設(shè)計一對馬源性成分(Horse)保守區(qū)特異性引物結(jié)合一條特異性探針,用熒光PCR技術(shù)對馬源性成分(Horse)保守區(qū)的DNA進行體外擴增檢測,從而達到快速檢測之目的。

轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)【試劑組成】

規(guī)

酶液

50μL×1 管

Horse反應(yīng)液

500μL×2 管

Horse陽性質(zhì)控品

50μl ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μl×1 管

注:

1) 不同批號試劑不能混用。

2) 試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標示的檢測次數(shù)。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次。有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycle、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g。

【保存和運輸】上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過 6 個月,標本運送應(yīng)采用 2-8℃冰袋運輸

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g,剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2 核酸提取

1.3 提取采用提取或試劑磁珠法或離心柱法,請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 10份,多配制 1 份),每測試反應(yīng)體系配制如下表:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時間

收集熒光信號

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

5. 結(jié)果分析判定

  • 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline Threshold:一般直接按機器自動分析的結(jié)果分析,當曲線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline start (一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop (一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold Value (上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。

5.2 判斷

a) 檢測通道 Ct 35,有 FAM 熒光信號檢出,并出現(xiàn)典型的擴增曲線,判斷樣品為陽性。

b) 30<Ct ≤35 時,且有典型的擴增曲線時,則需重復(fù)實驗。再次擴增后檢測體系的Ct 值仍≤35,且有典型的擴增曲線,則判定該樣品含有相應(yīng)的動物源性成分。當再次擴增后,檢測體系 Ct 值>35,或無典型的擴增曲線,則判定該樣品不含相應(yīng)的動物源性成分。

6. 質(zhì)控標準

a) 空白對照:無FAM 熒光信號檢出或 Ct ≥35,未出現(xiàn)典型的擴增曲線。

b) 陰性對照:無FAM 熒光信號檢出或 Ct ≥35,未出現(xiàn)典型的擴增曲線。

c) 陽性對照:有 FAM 熒光信號檢出,并出現(xiàn)典型的擴增曲線Ct 值<30。

d) 以上應(yīng)同時滿足,否則本次實驗無效。

轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)【注意事項】

? 所有操作嚴格按照說明書進行;檢驗過程中,參照《GB/T 27403 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測》的規(guī)定進行。

? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;

? 反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

? 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服;

? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;

? 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

? 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全   通則》進行處理。

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滬崢PCR優(yōu)勢:

   1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保
所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測。

   2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證。

   3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

   4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

 

P CR實驗概述



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